主營產品：分光(guāng)光(guāng)度計，紫(zǐ)外可見(jiàn)分(fēn)光光度計(jì)
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做(zuò)實(shí)驗(yàn)的(dí)小(xiǎo)夥伴，是不是(shì)經常(cháng)被(bèi)“檢(jiǎn)出(chū)限(xiàn)"，“定量限"這(zhè)些概念搞得頭(tóu)暈眼(yǎn)花？一份(fèn)數據(jù)可不可(kě)靠，方(fāng)法(fǎ)的(dí)靈(líng)敏度是(shì)關鍵。這篇文章(zhāng)，上海(hǎi)析(xī)譜儀器有限公(gōng)司專(zhuān)業工(gōng)程師(shī)帶(dài)來(lái)幹(gān)貨滿滿(mǎn)的實操(cāo)指(zhǐ)南(nán)；幫(bāng)你搞定(dìng)分(fēn)光(guāng)光(guāng)度法(fǎ)中(zhōng)檢(jiǎn)出限的測定。
TU-1810紫外(wài)可見分光(guāng)光度(dù)計(jì)
1.什麼是檢出(chū)限
簡單(dān)來說，檢出限(xiàn)就是你的(dí)儀器和方法(fǎ)能(néng)夠“有(yǒu)把握地"檢測(cè)出待測(cè)物(wù)質的小(xiǎo)濃(nóng)度。
請注(zhù)意(yì)關(guān)鍵(jiàn)詞：“有(yǒu)把(bǎ)握(wò)地(dì)"——它不(bù)是(shì)說儀(yí)器指針(zhēn)動(dòng)了一(yī)下就算檢出，而(ér)是指(zhǐ)測出的信號(hào)能(néng)明(míng)確地(dì)區分於空(kōng)白溶(róng)液的背(bèi)景噪音，並(bìng)且有足夠(gòu)的置信(xìn)度(dù)（通(tōng)常是99%的置信水平(píng)）。
為什麼它重(zhòng)要(yào)？評(píng)價方(fāng)法性能(néng)：檢(jiǎn)出(chū)限是(shì)衡量分析方法(fǎ)靈敏度(dù)的(dí)核心指標(biāo)之一。數值越低(dī)，方法(fǎ)越(yuè)靈敏。判(pàn)斷數據可靠(kào)性(xìng)：當樣(yàng)品濃度低(dī)於(yú)檢出範(fàn)圍(wéi)，你的(dí)檢(jiǎn)測結果應(yīng)報(bào)告為“未(wèi)檢出"（ND），而不(bù)是一(yī)個具體的(dí)數值(zhí)，否(fǒu)則(zé)會誤(wù)導他(tā)人。滿足標準要求：很多行(háng)業標準(zhǔn)和論(lùn)文投稿(gǎo)都要(yào)求(qiú)提(tí)供(gōng)方法的(dí)檢(jiǎn)出(chū)限。
2.三(sān)步(bù)算出檢出限(xiàn)
國際上zui常用(yòng)，也(yě)最(zuì)規範的(dí)方法是(shì) “空(kōng)白(bái)標(biāo)準偏(piān)差(chà)法(fǎ)"。別怕(pà)，公式很簡(jiǎn)單，我(wǒ)們(mén)一步步(bù)來。
第1步：準備(bèi)空(kōng)白(bái)溶液(yè)
這(zhè)裏(lǐ)的“空白"指的是(shì)不含待測(cè)物(wù)質，但經歷(lì)了(liǎo)全(quán)部實驗流(liú)程(chéng)的溶液。比(bǐ)如，你(nǐ)用某種試劑(jì)處(chǔ)理樣(yàng)品(pǐn)，那麼(mó)空白(bái)溶(róng)液就應(yīng)該加入(rù)等量(liáng)的試劑，並經過同樣(yàng)的(dí)加熱，定(dìng)容(róng)等(děng)步(bù)驟。關(guān)鍵(jiàn)：空(kōng)白(bái)必(bì)須真實反(fǎn)映(yìng)整個分析過程帶(dài)來(lái)的(dí)背(bèi)景幹擾。
第2步：連續(xù)測(cè)定空白信(xìn)號
用(yòng)上(shàng)海(hǎi)析譜(pǔ)製(zhì)造的紫外(wài)可(kě)見(jiàn)分光(guāng)光度計TU1810，連續測(cè)定空白溶(róng)液(yè)的吸(xī)光度（OD值或吸光度A）至少10次(cì)（建議11-20次，次數越多統計(jì)結(jié)果(guǒ)越可靠）。記(jì)錄下每一次的測量(liáng)值(zhí)。
操(cāo)作提示：
※ 保持儀(yí)器(qì)穩定。
※ 每次(cì)測量前，都(dū)用(yòng)同一個(gè)空(kōng)白溶液衝洗比色(sè)皿(mǐn)。
※ 記(jì)錄數據(jù)要準確。
第3步：計算與結果(guǒ)
現(xiàn)在輪(lún)到(dào)數(shù)學(xué)時間了(liǎo)，隻(zhī)需(xū)兩個(gè)公(gōng)式：
1，計(jì)算(suàn)空(kōng)白信號的標準偏(piān)差（SD）
把你測到(dào)的(dí)所有空白(bái)信號(hào)值(zhí)（比如(rú)11個(gè)吸(xī)光度(dù)值）輸(shū)入(rù)計算器或(huò)Excel，直(zhí)接使(shǐ)用(yòng) STDEV.S 函(hán)數(shù)計算(suàn)標準(zhǔn)偏差(chà)。我(wǒ)們記這個(gè)結(jié)果為SDₕ（空白標(biāo)準(zhǔn)偏(piān)差）。
2，套用公式，計(jì)算(suàn)檢出(chū)限(xiàn)（LOD）
公(gōng)式(shì)：LOD = 3 × SDₕ / b
這個(gè)“3"就(jiù)是(shì)統(tǒng)計學(xué)上99%置信(xìn)度的係數(shù)，意(yì)味(wèi)著(zhuó)信(xìn)號強度(dù)是空白(bái)波動(dòng)範圍(wéi)的(dí)3倍時(shí)，我們才敢說(shuō)“真的(dí)測(cè)到了"。
注意：上(shàng)麵(miàn)的LOD是以(yǐ)吸光(guāng)度(dù)（A）為單(dān)位的，我們最終需要的是濃(nóng)度！
3，將(jiāng)檢出限轉(zhuǎn)換(huàn)為濃度單位
你需(xū)要(yào)知(zhī)道方(fāng)法(fǎ)的(dí)靈敏度，也就是(shì)標準曲綫的斜(xié)率（b）。假(jiǎ)設你(nǐ)的(dí)標準(zhǔn)曲綫回(huí)歸方程是
A =a + b×C（C是濃(nóng)度(dù)），那(nà)麼(mó)斜率(shuài)就是b。
最終濃(nóng)度檢出限(xiàn)（LOD₍c₎） = 3×SDₕ / b
