紫外(wài)可(kě)見分光分度計具有(yǒu)靈敏度高，操(cāo)作簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)等優點，是(shì)生物化(huà)學實驗中常用的實驗方(fāng)法。許(xǔ)多(duō)物質(zhì)的測定(dìng)都采用(yòng)分(fēn)光光度(dù)法(fǎ)。在分光(guāng)光(guāng)度計中(zhōng)，將不(bù)同(tóng)波長的(dí)光(guāng)連續地照射到一定濃度的(dí)樣(yàng)品溶(róng)液時，便(biàn)可(kě)得到(dào)與不(bù)同(tóng)波長(cháng)相(xiāng)對(duì)應的吸(xī)收強度(dù)。
紫(zǐ)外可(kě)見分光(guāng)分度計的(dí)吸(xī)光度範(fàn)圍應(yīng)該(gāi)是(shì)在0.3-0.7之(zhī)間(jiān)，一般(bān)在(zài)0.2-0.8的範圍裏(lǐ)準確(què)。在分(fēn)析過程中，很(hěn)多(duō)人都是(shì)做一(yī)條標(biāo)準(zhǔn)曲(qū)綫(xiàn)，然後去測(cè)定(dìng)樣品，很(hěn)少有人關心(xīn)誤(wù)差方(fāng)麵(miàn)的(dí)問題。
在(zài)分光分析中(zhōng)，化(huà)學條件引(yǐn)起的(dí)誤差比(bǐ)較(jiào)大，有關(guān)吸光(guāng)度(dù)測量的(dí)誤差(chà)，很(hěn)多(duō)人都從書上看的，認為(wéi)吸光(guāng)度在0.2-0.8之(zhī)間(jiān)誤差(chà)小(xiǎo)，在0.434處最(zuì)小，但(dàn)不(bù)是(shì)特清楚理論根(gēn)據。還有(yǒu)一個問(wèn)題，如(rú)果吸(xī)光度(dù)在2.0，難(nán)道我們(mén)就去稀釋樣品，讓(ràng)其吸光度在0.2-0.8的範(fàn)圍(wéi)內(nèi)嗎(má)？反(fǎn)之(zhī)，如(rú)果(guǒ)吸光(guāng)度(dù)在0.02，那我(wǒ)們(mén)是不(bù)是(shì)要(yào)濃縮(suō)樣(yàng)品(pǐn)呢(ní)？
對(duì)此有(yǒu)兩種不同(tóng)的看法：
1.如果吸光(guāng)度不(bù)在(zài)0.2-0.8之間(jiān)，我(wǒ)們(mén)要去稀(xī)釋(shì)或(huò)濃(nóng)縮樣(yàng)品來(lái)進行測(cè)量(liáng)；
2.如果吸(xī)光度(dù)不在0.2-0.8之(zhī)間(jiān)，直接(jiē)進行測(cè)量，因為稀(xī)釋(shì)或濃(nóng)縮(suō)樣(yàng)品產生的誤(wù)差遠遠大於直接測(cè)量吸(xī)光(guāng)度產生(shēng)的誤差(chà)。
在(zài)分光光(guāng)度計中，透射比的標尺是均匀(yún)的。吸光(guāng)度(dù)與透射比為(wéi)負(fù)對數(shù)關係(xì)，所(suǒ)以吸(xī)光度(dù)的標尺刻度是不均匀的。因此，對於同(tóng)一台(tái)儀(yí)器(qì)，讀(dú)數的(dí)波動對(duì)透(tòu)射(shè)比(bǐ)來說，應基(jī)本為(wéi)一定值(zhí);而(ér)對吸光(guāng)度來說，它的讀(dú)數則(zé)不在(zài)為定值。由分光(guāng)光(guāng)度(dù)計讀數(shù)標尺上吸(xī)光(guāng)度與透射(shè)比的(dí)關(guān)係可(kě)以看出，吸光度(dù)越(yuè)大，讀(dú)數波動(dòng)所引(yǐn)起(qǐ)的吸光(guāng)度誤(wù)差(chà)也(yě)越大。
